随着消毒学的发展, 研究用于水消毒的产品日益增多, 采用正确的检测技术鉴定其消毒效果非常重要。 以往用抽样活菌计数法检测水消毒效果, 存在漏检水中少量存活菌的现象,为科学、准确地检测消毒产品对水中微生物的杀灭作用 , 我们
采用微孔滤膜抽滤法对二氧化氯杀灭水中大肠埃希菌的效果进行了检测, 并观察温度、pH值改变、有机物存在时对二氧化氯杀菌效果的影响。 现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 人工染菌水样配制
试验菌为大肠埃希菌, 取24h新鲜大肠埃希菌培养物, 用生理盐水制备成菌悬液。 实验时直接加入到不同试验水体中即成染菌水样, 其含菌量应为5×104cfu/100ml～5×105cfu/100ml。
1.2 中和剂鉴定试验
试验菌为大肠埃希菌, 试验设6组,按悬液定量法进行试验。 具体分组为:①消毒剂+菌悬液;②(消毒剂+菌悬液)+中和剂;③中和剂+菌悬液;④(消毒剂+中和剂)+菌悬液;⑤稀释液+菌悬液;⑥稀释液+中和剂+培养基。 试验结果, 以第6组不长菌, 第3、4、5组组间菌数相差≤15%,第1组不长菌或菌数远少于第2组, 第2组菌数≥5cfu/ 平板, 表明所选中和剂及其浓度适宜。
1.3 微孔滤膜处理
选用孔径为0.45μm的微孔滤膜, 滤膜大小直径为60mm , 滤器为B-60I型玻璃过滤器;试验前将滤膜置于蒸馏水中煮沸消毒3次, 每次15min , 滤器用压力蒸汽(121℃,20min)灭菌。
1.4 实验室杀灭试验
用微孔滤膜抽滤法进行所有试验。将装有人工染菌水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱(20±2)℃,开动磁力搅拌器, 使细菌在水中分布均匀后, 加入消毒剂迅速搅拌并计时, 待作用至规定时间吸取水样注入装有中和剂的三角烧瓶中。 将中和后水样分别取100,10,1ml各2份, 注入滤器中。 抽滤, 水样滤完后, 用无菌镊子夹取滤膜边缘, 移放在品红亚硫酸钠培养基平板上。 置37℃恒温箱内培养24h后计数, 试验同时设阳性对照和阴性对照。 阳性对照组以未经消毒的试验菌污染水样进行活菌培养计数;阴性对照组以未试验所用同批次未经使用的培养基进行培养, 观察有无细菌生长。天然水样模拟现场消毒试验时在天然井水中加入大肠埃希菌后进行杀菌试验, 方法同实验室杀菌试验。
1.5 杀菌效果的影响因素观察
观察水温影响是将人工染菌水样温度分别调控在5,20,30℃条件下, 按含二氧化氯0.5mg/L加入消毒片, 作用后按实验室杀菌试验方法进行。观察有机物影响是在人工染菌的水样分别加入腐殖酸, 使色度分别为0 ,10, 15度, 按含二氧化氯0.5mg/L加入消毒片。将人工染菌水样的pH值分别调为6.5,7.0和8.5,按含二氧化氯0.5 mg/ L加入消毒片, 观察pH值对杀菌效果的影响。作用之后, 均按实验室杀菌试验方法评价结果。
2 结 果
2.1 中和剂试验
结果表明,5g/L硫代硫酸钠可完全中和含二氧化氯1mg/L的消毒液, 结果符合规定的要求。
2.2 杀菌试验
以含二氧化氯0.5mg/L加入消毒片, 作用5min可使人工染于脱氯自来水中大肠埃希菌数下降至0cfu/100ml。 加入消毒片使二氧化氯浓度为0.5mg/L作用10min使天然井水中人工污染的大肠埃希菌数降至0cfu/100ml,随着消毒剂浓度增加,作用时间的延长,消毒效果增加。
2.3 影响因素观察
2.3.1 水温
在水温为5℃时含二氧化氯0.5mg/L的消毒液对水中大肠埃希菌杀灭效果有影响, 水温为20℃以上, 杀菌效果不受影响(表1)。
3 讨 论
研究采用微孔滤膜抽滤法, 观察二氧化氯消毒片对水中微生物的杀灭效果, 结果准确、科学。 将含消毒剂的水样和微生物作用至规定时间, 加入中和剂中和后, 将全部作用水样过滤计数, 克服了悬液定量杀灭试验需经稀释后取部分检样计
数的缺点。 同时研究证明,含0.5mg/L二氧化氯溶液作用5min可完全杀灭水中大肠埃希菌, 作用10min可完全杀灭天然井水中大肠埃希菌, 效果优于含氯消毒剂。 含氯消毒剂能与水中有机物反应产生致癌物质三氯甲烷, 而二氧化氯杀菌效率高, 不但能杀灭水中各种微生物, 还能杀灭原虫和藻类, 有效清除水中异味, 沉淀水中铁和锰, 有利于改善饮用水的清洁度, 并且不产生三卤甲烷和其他有害物质, 是理想的氯替代饮水消毒剂。 但水温低于5℃, pH值≥8.5, 水中存在大量有机物时对其杀菌效果有影响, 用于此类水体消毒时应适当提高其浓度或延长作用时间。
