论述微孔滤膜在奶牛血清检测中的应用
导读:近年来开始应用条件温和的高效液相色谱法(HPLC)对人体血清、血浆或红细胞膜脂肪酸浓度进行检测。HPLC分析奶牛血清中脂肪酸浓度的方法尚未见报道。本文天津津腾实验设备有限公司建
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发布日期：2019-12-16 09:18【大 中 小】
近年来开始应用条件温和的高效液相色谱法(HPLC)对人体血清、血浆或红细胞膜脂肪酸浓度进行检测。HPLC分析奶牛血清中脂肪酸浓度的方法尚未见报道。本文天津津腾实验设备有限公司建立HPLC检测奶牛血清中脂肪酸浓度的方法，可用于奶牛脂肪酸代谢的相关研究。
1.脂肪酸的衍生化
取样品小瓶或标准曲线小瓶，加入2－溴苯乙酮丙酮溶液50μL及三乙胺溶液50μL，加入丙酮300μL，盖紧螺旋盖，震荡1min，置95℃干燥箱中反应15min，取出冷却，加入75μL醋酸丙酮溶液，震荡1min，置95℃干燥箱中反应5min，取出冷却，氮气吹干，0.5mL甲醇复溶，过津腾微孔滤膜，置1.5mL上机小瓶中。
2.色谱条件
色谱柱InertSustainC18(150mm×2.1mm，3μm)。流动相:A液为乙腈，B液为甲醇－水(50∶50)，0～30min乙腈的浓度为52%，30～50min乙腈的浓度从52%升至79%，50～60min乙腈的浓度从79%升至85%，60～65min乙腈的浓度从85%升至100%，保持5min，乙腈的浓度恢复52%，平衡20min。流速:0.45mL/min，检测波长:244nm，柱温:50℃。进样体积:10μL。按内标标准曲线计算血清中脂肪酸含量。
3衍生化方法
脂肪酸没有紫外吸收，使用紫外检测器进行检测需要进行衍生化反应。采用2-溴苯乙酮作为衍生化试剂，操作简单方便，衍生化后产物稳定，在60min内即可完全出峰。乙腈、丙酮和正己烷均是良好的衍生化反应介质，水的存在将会导致反应得率的降低，本试验天津津腾实验设备有限公司采用干燥箱加热的方法进行衍生化反应。
4结论
本研究天津津腾实验设备有限公司建立的HPLC方法的精密度与回收率满足质量控制要求，为奶牛血清中脂肪酸的含量检测提供了方法参考。
