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控制菌检查方法

导读:菌液计数和纯度控制菌种的纯度和计数稳定是加菌回收试验的关键。


返回列表 来源:未知 发布日期:2024-09-23 14:46【

控制菌检查方法适用性试验大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、梭菌的检查方法适用性试验,一般是取1∶10供试液10mL(相当于样品1g或1mL)接种到100mL增菌液中,并加入不大于100cfu的阳性菌,按照药典的规定进行培养,再划线相应的选择分离平板,如在选择分离平板能长出相应菌落形态的菌株,则认为接种到100mL增菌液的方法可行。

如供试品有一定的抑菌作用,则把增菌液的体积逐步增加到200、300、400、500mL,直到适宜体积的增菌液能检出所加入的阳性菌株。对于一些抑菌作用特别强的样品,增菌液的体积增加到600mL,仍然不能消除其抑菌作用的,则考虑采用中和法、薄膜过滤法或分膜过滤联合培养基稀释法。

分膜过滤联合培养基稀释法可以有效解决规定量的供试品溶液在1张膜过滤堵膜的操作难题。李敏等利用磺胺类药物与对氨基苯甲酸竞争性结合二氢蝶酸合成酶、阻断细菌叶酸的合成而干扰细菌生长繁殖的反应原理,在做磺胺嘧啶鱼肝油滴鼻剂的控制菌检查方法适用性试验时,将供试品接种至100mL含0.5%对氨基苯甲酸的胰酪大豆胨液体培养基,可消除供试品对金黄色葡萄球菌的抑制作用。

沙门菌的取样量是10g(或10mL),亦是按照以上的实验思路进行适用性试验研究。耐胆盐革兰阴性菌的肠道增菌液体积一般为10mL,如有一定的抑菌作用,把肠道增菌液的体积增加到15mL。

菌液计数和纯度控制菌种的纯度和计数稳定是加菌回收试验的关键。使用天津津腾微生物限度仪适用性试验涉及到金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、白色念珠菌、黑曲霉、梭菌等8种菌株。