2019-11-26 10:15
黑土豆果皮呈黑紫色，该品种富含花青素，花青素除对致癌物质有抑制作用外，还可以增强人体免疫力，延缓衰老，增强体质，增强视力。花青素的检测方法主要有分光光度法、高效液相色谱法。目前，针对黑土豆中花青素提取研究不多，本研究天津津腾实验设备有限公司采用微波辅助、乙醇提取黑土豆中的花青素，高效液相色谱法（HPLC）测定提取液中花青素的含量，在单因素试验的基础上，通过响应面分析法进行优化，确定最优提取条件，为黑土豆在营养保健、食品、医药等领域的应用提供参考依据。
1仪器
LC-20AT高效液相色谱仪、SPD-20A紫外-可见检测器：日本岛津公司；TP150超声波清洗机：天鹏电子新技术（北京）有限公司；GM-0.33A隔膜真空泵(无油)：天津市津腾实验设备有限公司；电子分析天平：赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；1000mL溶剂过滤器：天津市津腾实验设备有限公司；Joyoung/九阳V5压榨机：九阳股份有限公司；WTS03-1微波提取器：南京杰全设备公司。
2花青素提取流程
从磨口广口瓶中量取5mL浆汁，置于微波萃取器中，在一定的温度下，按照一定的体积比加入一定浓度的乙醇，提取一定的时间后，提取液冷却至室温后，取澄清滤液，用0.45µm津腾针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于100mL容量瓶中，备用。
3花青素标准曲线的建立
精密称取干燥至恒重的花青素标准品10mg，置于100mL容量瓶中，用无水乙醇定容，配成0.1mg/mL的花青素对照品溶液，摇匀，取澄清滤液，用0.45µm津腾针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于10mL容量瓶中，备用。色谱条件为色谱柱：ShmadzuShim-pack-vpODS（150mm×4.6mm，5µm）；柱温：室温；流动相:甲醇(0.02mol/L)-甲酸(95∶5)，流速：1.0mL/min；进样量：10μL。准确量取配制好的标准溶液3、6、9、12、15、18mL，转移至100mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，混匀，按色谱条件进行测定，分别记录色谱峰面积，以黑土豆中花青素的质量浓度为横坐标C(mg/mL)，色谱峰面积A为纵坐标绘制标准曲线，计算出标准曲线的回归方程。
4结论
对黑土豆中花青素进行微波萃取，通过响应面优化最佳纯化条件，通过HPLC法测得黑土豆中花青素的含量来验证，最后确定微波萃取黑土豆中花青素优化条件为乙醇的浓度60%，料液体积比1∶20，微波辅助提取温度50℃、微波辅助提取时间20min，测得黑土豆中花青素的含量为0.1667mg/mL，与响应面优化时预测值相对误差为0.0026mg/mL，故响应面法确定的工艺条件准确可靠、具有实际应用价值。